美國當(dāng)?shù)貢r(shí)間11月17日，美國食品藥品監(jiān)督管理局FDA發(fā)布了一項(xiàng)緊急使用授權(quán)（EUA），批準(zhǔn)了首個(gè)可提供快速結(jié)果的“新冠居家自檢測試盒”！不用寄送樣本，30分鐘內(nèi)可快速診斷結(jié)果.

這套測試盒名叫：Lucira COVID-19一體化測試盒?（Lucira COVID-19 All-In-One Test Kit）是一種分子(實(shí)時(shí)環(huán)介導(dǎo)擴(kuò)增反應(yīng))單用一次性檢測，預(yù)計(jì)售價(jià)在50美元以下。Lucira是美國首個(gè)可以完全自我管理，并在家中就能獲得新型冠狀病毒SARS-CoV-2檢測結(jié)果的工具。

檢測原理

Lucira COVID-19一體化測試盒利用RT-LAMP技術(shù)檢測SARS-CoV-2的N基因RNA。?這種技術(shù)可以在不到30分鐘內(nèi)從幾個(gè)RNA拷貝中產(chǎn)生信號(hào)。?RT-LAMP放大反應(yīng)分兩個(gè)階段進(jìn)行，逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增。?在逆轉(zhuǎn)錄過程中，逆轉(zhuǎn)錄酶具有RNase?H?活性，將RNA靶標(biāo)轉(zhuǎn)化為cDNA，然后通過DNA聚合酶擴(kuò)增cDNA。?擴(kuò)增放大的過程產(chǎn)生pH變化，隨后反應(yīng)混合物中染料的顏色變化。

樣品管中含有洗脫緩沖液，可以讓在室溫下對拭子內(nèi)容物進(jìn)行洗脫和溶解，釋放病毒RNA，洗脫完成后，洗脫液會(huì)帶著樣本進(jìn)入一個(gè)微流控模塊，該模塊分為幾個(gè)單獨(dú)的反應(yīng)室。洗脫劑會(huì)溶解預(yù)裝在模塊中的凍干試劑，然后一同在模塊中完成RT-LAMP反應(yīng)。?

當(dāng)內(nèi)部電子加熱元件檢測到該模塊腔室填充就會(huì)自動(dòng)打開，然后在反應(yīng)室內(nèi)完成擴(kuò)增。?整個(gè)反應(yīng)被控制在流體單元內(nèi)，在擴(kuò)增的過程中，測試單元的其他部分與樣品不會(huì)產(chǎn)生接觸。?

該產(chǎn)品的檢測靶標(biāo)為SARS-CoV-2RNA(N基因的兩個(gè)非重疊區(qū)域)，同時(shí)還設(shè)計(jì)了陽性內(nèi)部控制(PIC)和裂解內(nèi)部控制(LIC))。?其結(jié)果的判讀采用了光學(xué)和電子元件實(shí)時(shí)檢測反應(yīng)混合物的顏色變化。然后通過機(jī)載微處理器分析顏色變化數(shù)據(jù)，以檢測靶標(biāo)的存在。然后使用設(shè)備固件中包含的診斷算法來確定病人的感染狀態(tài)，并通過LED指示器顯示結(jié)果。測試結(jié)果顯示為陽性、陰性或無效。陽性結(jié)果可在11分鐘內(nèi)顯示；陰性或無效結(jié)果將在30分鐘內(nèi)顯示。在測試結(jié)束后，結(jié)果顯示持續(xù)至少1小時(shí)。

操作步驟

（1）打開電池門，插入電池，設(shè)備顯示“READY”綠燈，準(zhǔn)備就緒

（2）打開樣本瓶袋2，移除樣本瓶密封

（3）樣本采集：取出拭子，用手柄端握住，向后傾斜頭部，輕輕把拭子插入你/病人的鼻孔，剛開始會(huì)略微有阻力，?一旦拭子頂部完全進(jìn)入鼻腔內(nèi)，將拭子在鼻孔內(nèi)壁滾動(dòng)5次，然后在另一個(gè)鼻孔重復(fù)拭子步驟。?

（4）洗脫樣本，開始測試

將拭子插入樣本瓶中，然后旋轉(zhuǎn)攪拌15圈，來混合洗脫樣本，然后拿出拭子丟棄。

蓋上扣帽，將樣本瓶用力按進(jìn)測試模塊到鎖定。

測試自動(dòng)開始，READY開始閃爍

（5）查看結(jié)果

整個(gè)反應(yīng)過程會(huì)在30min內(nèi)完成，測試完成后，Done燈亮

這款產(chǎn)品的設(shè)計(jì)有點(diǎn)像之前清華大學(xué)做的一款新冠檢測的產(chǎn)品，都可以做到單人份，單機(jī)單次測試，我們再來看一下這款產(chǎn)品的性能參數(shù)。

檢測下限（LOD）-分析靈敏度

采用定量熱滅活SARS-CoV-2病毒在天然鼻腔Swab基質(zhì)(NNSM)中連續(xù)稀釋，然后取35μL轉(zhuǎn)移到一個(gè)新鮮的、未使用的鼻拭子上，然后按照標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行操作。在兩個(gè)試劑盒上運(yùn)行。通過在每批試劑盒上測試三個(gè)目標(biāo)濃度來確定設(shè)備的LOD。?

最終的2700cp/SWAB被確定為LOD，相當(dāng)于900cp/mL的VTM，假設(shè)拭子在VTM的3mL中100%洗脫。

抗干擾能力

在使用33種共生生物（包括13種細(xì)菌/真菌和20種病毒）的交叉反應(yīng)性測試中，評估了該方法的特異性。交叉 反應(yīng)性測試證實(shí)，在測試的濃度下，33種生物中沒有一種與LuciraCOVID-19全合一測試試劑盒交叉反應(yīng)。

因?yàn)楸旧硎且豢?strong>家用產(chǎn)品，那么受到取樣質(zhì)量的影響就會(huì)比較大，因此這款產(chǎn)品選取了10名未經(jīng)訓(xùn)練的、具有不同經(jīng)驗(yàn)的目標(biāo)客戶進(jìn)行了測試。

據(jù)公開的資料顯示，研究中的所有結(jié)果都是有效的，并與預(yù)期結(jié)果相匹配。SARS-CoV-2陽性和SARS-CoV-2陰性樣本與預(yù)期結(jié)果的總體 一致性為100。結(jié)果表明，未經(jīng)培訓(xùn)的預(yù)期用戶能夠使用LuciraCOVID-19一體化測試盒并獲得預(yù)期結(jié)果。

人類可用性研究

Lucira在兩個(gè)地點(diǎn)對398名健康、無癥狀的用戶進(jìn)行了人類可用性測試，以評估不同年齡、族裔和教育水平成功運(yùn)行Lucira COVID-19一體化測試盒的能力。對于Lucira的所有可用性研究，參與者被招募到一個(gè)研究場所，并獨(dú)自嘗試Lucira一體化測試盒，只使用測試盒中提供的快速參考說明(QRI.通過單向鏡觀察受試者，并將其錄像，以便能夠記錄和核實(shí)其測試盒使用過程，包括鼻拭子自采集。為了評估測試盒的易用性和使用說明的清晰度，使用后的訪談以電子方式實(shí)時(shí)輸入。?

研究發(fā)現(xiàn)所有年齡的用戶都能夠成功地使用Lucira測試盒。值得注意的是，在所有14歲及以上的用戶中96%的人能夠順利的使用，并在第一次嘗試時(shí)正常啟動(dòng)測試，而不必回顧QRI的說明。?

97%的用戶將他們的體驗(yàn)評為“更容易或是他們預(yù)期的東西”，59%的用戶將他們的測試體驗(yàn)評為“比他們預(yù)期的更容易”。

近100%的用戶將測試盒說明書評為能夠清晰理解操作過程。在使用了Lucira COVID-19一體化測試盒之后，所有年齡段的用戶中100%的人都表示他們有信心自己在家進(jìn)行測試。

所有用戶都能夠正確地解釋測試結(jié)果。99%的18歲及以上的成年人和95%的14-17歲的青少年在兩個(gè)鼻孔中采集樣本。92%的18歲及以上成年人的采樣時(shí)間至少為11秒，平均采樣時(shí)間為18秒。92%的14-17歲青少年的采樣時(shí)間為9秒，平均采樣時(shí)間為17秒。

臨床研究（與羅氏比較）

Lucira進(jìn)行了一項(xiàng)臨床測試研究，以確定Lucira COVID-19一體化測試試劑盒在預(yù)期使用條件下的臨床性能。在本研究中，懷疑有癥狀的受試者 COVID-19在其住所外進(jìn)行了測試。受試者獨(dú)立收集Lucira鼻拭子樣本并進(jìn)行測試。

將結(jié)果與高靈敏度分子FDA 授權(quán)的SARS-CoV-2檢測方法進(jìn)行了比較，并與Lucira試驗(yàn)同時(shí)收集并在臨床實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的樣品進(jìn)行了比較。共有101名受試者參加了這項(xiàng)研究。?

與高靈敏度分子FDA授權(quán)的SARS-CoV-2分析相比，所有樣品的總陽性率(PPA)為94.1%（48/51)，或96.0%(48/50），采用羅氏COBA S-CoV-2試驗(yàn)進(jìn)行差異分析。所有三個(gè)不一致的樣本在比較測試時(shí)都有較高的CT值(>37.5。排除這些病毒水平很低的樣本，Lucira達(dá)到了100%（45/45）的陽性率。

參考資料：Lucira? COVID-19All-In-One Test KitInstruction for Use